Oligonucleótido

Oligonucleótido

Un oligonucleótido es una secuencia corta de ADN o ARN, con cincuenta pares de bases o menos.

Tienen distintas funciones: se utilizan como cebadores en reacciones de amplificación, como sondas de hibridación y en bloqueos específicos de ARN mensajero.

Contenido

Síntesis de oligonucleótidos

Artículo principal: Síntesis de oligonucleótidos

Un oligonucleótido es una molécula compleja formada a su vez por varios nucleótidos, cada uno de los cuales está compuesto por una base nitrogenada, un hidrato de carbono y un grupo fosfato. La síntesis de oligonucleótidos se basa en una serie de reacciones en las que se van protegiendo y desprotegiendo cíclicamente los diferentes centros reactivos de la molécula:

  • Protector del hidroxilo 2': Tert-butyl dimetilsilil (TBDMS).
  • Protector del fosfato libre: B-cianoetilo.
  • Protector de los heterociclos de las bases: diferentes grupos amida.

Aplicaciones en terapia génica

Los oligonucleótidos se emplean en terapia génica como estrategia para el silenciamiento de genes. Se utilizan oligonucleótidos de 12 a 20 pares de bases complementarios a los ARN mensajeros de los genes que queremos silenciar.

Dentro de la célula, el oligonucleótido se une a su ARN mensajero diana y bloquea su traducción, esto es, el ribosoma va a traducir el ARN mensajero hasta que se encuentra el oligonucleótido y el proceso se detiene. Además, el hecho de que la ARNasaH reconozca el híbrido oligo-ARN y lo degrade es otra ventaja de esta técnia. Es importante diseñar el oligonucleótido cerca del inicio de traducción o bien asegurarse de que el posible producto resultante no tenga función biológica, para que el silenciamiento sea efectivo.

Proceso de degradación de un ARN específico por la ARNasa H tras la formación de un duplex de ARN

Los oligonucleótidos ideales para terapia génica deben tener las siguientes características:

  • Deben formar complejos estables con el material genético.
  • Deben ser específicos de la diana.
  • Deben poseer una alta estabilidad y una vida media más larga de lo habitual para resistir a las nucleasas.
  • Deben poder pasar sin problemas a través de las membranas celulares.
  • No deben acumularse en órganos u orgánulos celulares.
  • Su tamaño debe ser de entre 18 y 20 pares de bases.

Los oligonucleótidos pueden usarse in vivo, pero poseen una vida media muy corta y una concentración baja. Precisamente porque no tiene efectos duraderos, el principal problema de los oligonucleótidos como terapia génica es que requieren dosis sucesivas.

Se modifican químicamente para tener una vida media más larga, bien en el oxígeno de los puentes fosfato, en las bases o en el fosfato que no se encuentra en los puntes de unión. Se consideran por tanto como una droga/medicamento, ya que tienen no alteran el ADN y terminan por degradarse.

Las posibles aplicaciones de los oligonucleótidos podrían darse en terapia antiviral, terapia antibacteriana, terapia antiparasitaria, terapia anticáncer ex vivo, tratamiento de enfermedades de la piel, inhibición de la inflamación, supresión de oncogenes o supresión de genes dominantes.

Oligonucleótidos para salto de exón

En las mutaciones que provocan un fin anticipado de la traducción, los oligonucleótidos se emplearían para inducir un procesamiento alternativo en el ARN mensajero mutante, sin inlcuir el exón que contiene la mutación. De esta manera, el codón stop prematuro no sería leído por el ribosoma y la proteína podría continuar traduciéndose, luego el producto final sería el mismo que el del gen normal, sin mutación.

Oligonucleótios catalíticos

Si se une al oligonucleótido una molécula de EDTA-Fe, esto provoca la destrucción activa del ARN mensajero al que se une, con lo que el oligonucleótido puede liberarse para degradar otro ARN mensajero.

Triple hélice

Un oligonucleótido también podría unirse a la doble hebra de ADN, dando lugar a una estructura conocida como triple hélice. Si se une a un gen concreto, estaría inhibiendo su transcripción, y por tanto, de nuevo, silenciándolo. Sólo se necesitarían dos oligonucleótidos por célula (uno por cada cromosoma del par), de modo que se evitaría el problema de la dosis. Esta técnica sería útil para mutaciones dominantes. Sin embargo, el superenrollamiento del ADN y su interacción con las histonas dificulta la entrada del oligonucleótido en la doble cadena.


Wikimedia foundation. 2010.

См. также в других словарях:

  • oligonucleótido — Compuesto formado por el enlace de un pequeño número de nucleótidos. Diccionario Mosby Medicina, Enfermería y Ciencias de la Salud, Ediciones Hancourt, S.A. 1999 …   Diccionario médico

  • Oligonucleótido — Oligonucleotido son secuencias cortas de ADN o ARN, tipicamente con cincuenta o menos pares de bases. Tienen distintas aplicaciones : como cebadores en reacciones de amplificación, como sondas de hibridación y en bloqueos espcíficos de ARN… …   Enciclopedia Universal

  • Knockdown de genes — En biología molecular, el término knockdown de genes hace referencia a una técnica de genética molecular mediante la cual un organismo es genéticamente modificado para tener una expresión reducida de uno o más genes de su cromosoma a través de la …   Wikipedia Español

  • Síntesis de oligonucleótidos — La síntesis de oligonucleótidos es la síntesis química de fragmentos relativamente cortos de ácido nucleico con una secuencia estructural química definida. La técnica es extremadamente útil en la práctica actual en laboratorios, porque provee un… …   Wikipedia Español

  • Adenosín difosfato — General Fórmula molecular C10H15N5O10P2 número CAS 58 64 109 Masa molar 427,201 …   Wikipedia Español

  • Adenosín monofosfato — Estructura química del AMP. Adenosín monofosfato, abreviado AMP, es un nucleótido que se encuentra en el ARN. Es un éster de ácido fosfórico con en nucleósido adenosina. El AMP esta formado por fosfato, ribosa, y adenina. Su fórmula es C10 …   Wikipedia Español

  • Ingeniería genética — Este artículo o sección necesita referencias que aparezcan en una publicación acreditada, como revistas especializadas, monografías, prensa diaria o páginas de Internet fidedignas. Puedes añadirlas así o avisar …   Wikipedia Español

  • Chip de ADN — Ejemplo de un chip de ADN con 40000 sondas. Sinónimos Microarray de ADN DNA microarray Microarreglo de ADN Oligonucleótido array Micromatriz de ADN Gene chip ADN array …   Wikipedia Español

  • Computación basada en ADN — La Computación basada en ADN consiste en usar moléculas de ADN en vez de procesadores basados en silicio. Las ventajas de la computación por ADN se basan en dos características fundamentales: El gran paralelismo de las hebras de ADN. Muchos de… …   Wikipedia Español

  • PCR en tiempo real — PCR cuantitativa, qPCR, Q PCR (del inglés quantitative polymerase chain reaction) o PCR en tiempo real (del inglés real time PCR) es una variante de la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) utilizada para amplificar y simultáneamente… …   Wikipedia Español


Поделиться ссылкой на выделенное

Прямая ссылка:
Нажмите правой клавишей мыши и выберите «Копировать ссылку»