Plata metanamina de Gomori

Plata metanamina de Gomori

Plata metanamina de Gomori

Entre las coloraciones especiales para hongos, la plata-metenamina (o metanatima) de Gomori es la más empleada. La reacción tintorial está basada en que, en presencia de ácido peryódico, los polisacáridos de la pared celular de los hongos son oxidados a aldehídos; éstos, a su vez, reducen el complejo nitrato-plata metenamina produciendo una coloración café a negra, debido al depósito de la plata reducida en los lugares de localización de los aldehídos.

También se utiliza para la identificación de la melanina. Este pigmento está producido en la piel por los melanocitos. En los humanos la melanina se encuentra en piel, cabello, en el recubrimiento de la retina. Aunque los seres humanos generalmente poseen una concentración similar de melanocitos en su piel, estos expresan en algunos individuos y en algunas razas más frecuentemente el gen productor de melanina, por lo que se confiere una mayor concentración de melanina en la piel.

Contenido

Preparación de la muestra

El tejido debe ser fijado en formol para mejores resultados, y seccionado a 5 micras.

Reactivos

  1. Sol. de ácido bórico (solución A):
    1. 3,09 g ácido bórico
    2. 250 cc agua destilada
  1. Sol. tetraborato sódico (solución B):
    1. 4,77 g tetraborato sódico
    2. 250 cc agua destilada
  1. Sol. buffer borato (comprobar que el pH sea 8,2)
    1. 13 cc Solución A
    2. 7 cc Solución B
  1. Sol. de plata metanamina
    1. 42,5 cc metanamina (hexametilentetranamina) 3%
    2. 2,5 cc nitrato de plata 5%
    3. 12 cc buffer borato (pH 8,2)

Procedimiento

Debe evitarse, durante todo el proceso, el uso de intrumentos metálicos, ya que la plata precipitaría sobre ellos.

  1. desparafinar e hidratar
  2. ácido peryódico 0,5%, 12 min
  3. lavar con agua destilada
  4. sumergir los cortes en la solución de plata metanamina, 1 hora mínimo a 60 ºC; a partir de este tiempo comprobar regularmente al microscopio
  5. lavar con agua destilada
  6. cloruro de oro, 1min.
  7. lavar con agua destilada
  8. tiosulfato sódico 3%, 1-2 min
  9. lavar con agua corriente
  10. tinción de contraste (rojo nuclear, hematoxilina, verde luz...), 1 min aprox.
  11. deshidratar, aclarar, montar

Resultados

  • reticulina, membranas basales, hongos, mucinas, glucógeno: negro.
  • fondo: según tinción de contraste

Bibliografía

  • Sheehan, Dezna; Hrapchak, Barbara (1980). Theory and practice of Histotechnology, 2 Ed. edición, The C.V. Mosby Company.
  • (1992) ARP (ed.). Métodos Histotecnológicos. Instituto de patología de las Fuerzas Armadas de los EEUU (AFIP).
  • Arango Arteaga, Myrtha; Castañeda del Gordo, Elizabeth (2003). ARP (ed.). Micosis humanas: Procedimientos diagnósticos; exámenes directos, 2 edición, Corporación para Investigaciones Biológicas. ISBN 9789589400708.

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